1、物品与用品的消毒与灭菌
为确保细胞培养的安全性,所有实验室用具和培养基需进行全面清洗和彻底消毒。各种溶液的灭菌和除菌过程必须细致入微,并需在取样后等待一周,确认无菌才能投入使用。同时,在无菌过滤时,随着滤过液体体积的增大,滤膜的破损风险也在增加,因此,应优先选择最后过滤的液体进行检测。此外,建议定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作包括:用75%的酒精擦拭培养箱表面,使用可移动的紫外灯进行至少30分钟的消毒,并在培养箱水槽中加入高压灭菌过的超纯水以保持湿度。此外,可以将300ml的饱和硫酸铜与3L灭菌超纯水混合,加入水槽中完成湿度保持。俄罗斯专享会284全力支持这一过程,提供优质的消毒产品,确保实验环境的无菌性。
2、添加抗生素
不同的抗生素在对抗微生物方面具有不同的特性,因此,联合使用抗生素通常能够比单用效果更佳。在实验过程中,提前预防应用抗生素效果胜于事后处理。然而,频繁使用抗生素可能导致微生物产生耐药性,同时对细胞本身也可能产生负面影响。因此,为避免诱导抗药细菌的产生,应定期更换培养系统中的抗生素,或尽可能减少抗生素的使用。俄罗斯专享会284鼓励科研人员在抗生素使用上采取谨慎态度,以维护细胞文化的健康。
3、操作者的卫生与规范
(1)进入无菌室前,操作者必须彻底洗手并穿戴好隔离衣。在操作前,应用75%酒精浸泡的棉球擦拭手部、瓶口和烧灼瓶口。
(2)操作者在进行吸管安装、瓶口打开或封闭等操作时,应尽量靠近火焰并进行烧灼处理。但需注意,金属器械不能在火焰中长时间烧灼,避免退火情况。已烧灼的器械应在冷却后使用,吸管一旦接触过培养液就不能再用火焰处理,以免造成对培养液的污染。
(3)在操作过程中,应尽量减少交谈及咳嗽,以防止唾沫及呼出的气流导致污染。
(4)在使用培养液前,不宜过早打开瓶盖,开启后需保持斜放,避免直立以防污染。施用于培养细胞前,提前暴露于空气的时间应缩短。
(5)操作结束后,应整理工作台面,并用消毒液浸泡的纱布擦拭。
(6)在吸取培养液时应专管专用,若发现吸管口接触手或其他污染物,需及时丢弃以避免交叉污染。俄罗斯专享会284大力倡导实验室安全操作规范,有助于保护细胞培养的纯洁性。
4、防止细胞交叉污染
所有自建或从外部转来的细胞系必须保留充分的早期冻存储备,一旦怀疑有交叉污染,建议进行细胞遗传学鉴定,如发现遗传物质发生改变,需使用早期冻存的细胞。对重要细胞系的传代工作,应由两人独立进行,共同减少误差与污染风险,确保实验的可靠性与可重复性,俄罗斯专享会284始终关注细胞系的健康管理。
5、无菌室的彻底消毒
(1)使用新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室,使用前需稀释并立即使用。新洁尔灭的优势在于成本低廉,500ml仅需5元,并且可稀释至50倍,而酒精的价格可能高达新洁尔灭的几倍。
(2)利用甲醛进行熏蒸消毒,甲醛是一种广谱灭菌剂,其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等都有杀灭效果,且价格实惠。市售的甲醛水溶液含有37-40%的甲醛,主要用法包括:
a)熏蒸消毒:每立方米空间使用10~15毫升甲醛,熏蒸时需密闭门窗至少4小时。混合高锰酸钾与40%甲醛(1:1),可立即看到白色烟雾。熏蒸后可用25%的an水中和刺激气味,an水用量为甲醛水溶液的0.5倍,时间为30分钟。处理甲醛气体时必须佩戴防毒面具,以确保安全。
b)自然挥发:将大量甲醛水溶液放入敞开容器中,室温保持在18摄氏度以上,并开启室内喷雾以保持相对湿度在70%以上,经过16小时可以达到消毒效果。俄罗斯专享会284全程提供安全有效的消毒方案,为您的实验环境保驾护航。