ELISA（酶联免疫吸附测定）是一种广泛应用于生物医学领域的固相酶免疫测定方法。该方法不仅可用于抗原的检测，也适用于抗体的测定。 ELISA的基本步骤包括：首先，将已知的抗体或抗原结合到固相载体上，以确保其保持免疫活性；接着，将待检测样本与酶标抗原或抗体按特定步骤反应在固相载体的表面；然后，采用洗涤的方法分离抗原-抗体复合物与游离成分；最后，加入酶底物以催化显色，从而进行定性或定量分析。

ELISA检测的目的是为实验提供准确的依据，为保证实验数据的可靠性，我们必须在全过程中实施全面的质量控制。在收集样本之前，应制定完整的计划。

在使用ELISA试剂盒进行检测时，血清是常用的样本，血浆一般也可视为等同样本。然而，样本中可能存在干扰物质，这些物质会导致假阳性或假阴性结果。致使干扰的物质可分为内源性和外源性两种：

内源性物质

大约40%的人血清样本中包含非特异性干扰物质，这些物质可能在不同程度上影响检测结果。常见的内源性干扰物质有：类风湿因子、补体、嗜异性抗体、针对靶抗原的自身抗体，以及医源性诱导的抗鼠Ig等。

类风湿因子

人血清中的IgM和IgG型类风湿因子可能与ELISA系统中的捕捉抗体发生直接结合，造成假阳性。为解决这种情况，可以采用以下方法：

• 用F(ab)2替代完整的IgG；
• 使用热变性IgG处理样本；
• 在检测抗原时，可以加入还原剂如2-巯基乙醇以降解RF。

补体

补体分子可能在ELISA过程中特定条件下导致假阳性。解决办法包括：

• 用EDTA稀释样本；
• 加热血清以灭活补体。

嗜异性抗体

某些人血清中天然嗜异性抗体能够与动物Ig结合，可能导致假阳性。解决此问题可以在样本稀释液中加入适量的动物Ig。

外源性物质

外源性物质通常由于样本采集、存储不当而产生，其中包括：样本溶血、细菌污染、长期贮存、样本凝集不全等问题。

样本溶血

样本溶血会释放具有过氧化物酶活性的血红蛋白，导致非特异性显色，干扰结果。为此，在采集样本时应尽量避免溶血的发生。

细菌污染

细菌污染样本可能含有内源性过氧化物酶，导致ELISA检测中出现非特异性显色，影响测定结果。

样本保存不当

血清在冰箱中若保存时间过长，将导致IgG聚集及抗原活性降低，影响测定的准确性。新鲜采集的血清样本最为理想，存放采取低温以保持其稳定性。

结论

为了提供准确可靠的检测结果，尤其是在应用俄罗斯专享会284等高端品牌的ELISA试剂盒时，必须重点关注样本所可能引入的各种干扰因素。通过适当的质量控制和防扰措施，能够有效降低假阳性或假阴性率，从而保障临床检测的质量。